Titrering
Titrering är en analysmetod som innehar ett nära släktskap med pipettering, som gör att man kan avgöra den exakta slutpunkten för en gensvar och därför den exakta mängden reaktant i titreringsflaskan.
Byrett är en apparat bestående utav ett smalt, graderat glasrör med en glas- eller teflonkran i nedre delen, som är utdragen till en lång tagg.
Eller är nederdelen förbunden med en gummislang med en klämskruv.
I bägge fallen är det genomförbart att förlora utav fluid droppvis. Byretten nyttjas för grundlig mätning utav vätskor, särskilt inom den analytiska kemin.
Byretten innehar en extrem exakthet – en 50 cm3 byrett har en mättolerans på 0, 06 – 0, 1 cm3. Byretten är graderad uppifrån då den nyttjas för avtappning utav fluid från botten samt den avtappade mängden kan då avläsas genom vätskenivåns förändring mot skalan.
En byrett används för att leverera den övriga reaktanten till kolven och en tecken eller pH-mätare användes för att detektera slutpunkten för reaktionen.
Att göra en Titrering
Börja med att förbereda din byrett.
Din byrett bör konditioneras samt fyllas med titreringsmedel lösning.
Man bör avsyna så att det ej finns luftbubblor samt läckage, innan du fortsätter till titreringen.
Ta en initialvolym och notera den.
Innan man gör en titrering bör du räkna ut förväntad endpoint volym.
Bered lösningen som ska analyseras igenom att insätta den i en fläckfri Erlenmeyerkolv eller glas. Om provet är ett fixerad ämne, se till att det är totalt upplöst.
Lägg en magnetisk omrörare i kolven samt tillsätt tecken.
Använd byrett att effektuera titreringsmedel till i ett par ml utav din förväntade slutpunkt.
Man kommer att se att färgindikatorn växlar när titreringsmedlet möte lösningen i kolven, men innan det är färdgtitrerat går bort färgförändring när du fortsätter omrörningen.
Närma dej endpoint långsammt samt titta på färgen på ditt examination.
Begagnad en tvättflaska att spola kolvens sidor och spetsen på byretten, för att vara säker på att alla titreringsmedel blandas i kolven.
När du närmar dej slutpunkten, kan du tarva addera en delvis droppe titreringsmedel.
Du kan göra detta med en flink dragning av teflonkranen eller delvis öppna kranen och spola partiella droppar i kolven med en tvättflaska.
Se till att du vet vad slutpunkten ska se ut.
För fenolftalein är slutpunkten den första permanenta ljusrosa.
De ljusrosa tonas i 10 till 20 minuter.
Om man tror att man kan ha nått slutpunkten, kan man notera en avläsning samt lägga till en droppe.
Alltemellanåt är det lättare att anföra när du innehar gått förbi slutpunkt.
När man har nått slutpunkten, läs den slutliga volymen i byretten och notera i din anteckningsbok.
Minus den ursprungliga volymen för att bestämma mängden titreringsmedel som behövdes.
Använd denna koncentrationen utav titreringsmedel samt stökiometrin av titreringen reaktionen för att beräkna antalet mol reaktant i analyslösningen.
Titrering med en pH-mätare
Titrering med en pH-mätare följer samma förfarande som en titrering med en indikator, bortsett från att slutpunkten detekteras av en snabb förändring i pH, framför än färgförändringen på en indikator.
Ordna provet, omrörare, byrett, och pH-mätare elektrod så att du kan läsa pH och sköta byrett med enkelhet.
pH omslaget kan anlända mycket snabbt
Att ange slutpunkten absolut, anteckna pH gentemot volym titreringsmedel.
Hurdan använder man en Eppendorf
En autentisk “high-tech” pipett är Eppendorf’s så kallade ”blåsa”.
Den kan placeras stadigt på mynningen utav pipett.
Vid sidan av Eppendorf är en utskjutande fattig fäst.
Dra dra ned för att alstra ett tomrum därinnanför blåsan.
Begagna tummen för att avfyra en tvåvägsventil när du är beredd att göra er lösning i pipett men se till att munstycket på din pipett ligger under ytan på lösningen så att du inte suga in luft i din pipett.
Detta kan orsaka att massor av lösning att gå förbi in i filtret i blåsans area som kommer att begära demontering, uttorkning samt substitution av delar.
När en fullgod antal utav lösningen har dragits in, så att menisken är ovan märket, begagna tummen för att skjuta tvåvägsventilen dra ned.
Tillverkar det försiktigt så att menisken sjunker långsamt till märket.
Efter kan man flytta lösningen i pipetten till förlaget och tryck tvåvägsventilen spaken nedåt för att tömma pipetten.
Munstycket av pipetten kan hållas i öppna luften för överföringen.
Till slut, pipetter samt byretter ackumuleras inert fixerad material, som måste avlägsnas från tid till annan.
Munstycket utav en byrett som har stoff som ej kommer att passera genom.
Du kan tarva använda en lina, att gallra ut detta stoff.
Det är bäst att göra det med petcock ventilen bort så att när man gör en omvänd byk efter du petat ut så att det är ledigt, kan materialet tvättas ut vid platsen för ventilen i stället för vid den övriga änden utav byretten cylindern.
För att illustrera att alltemellanåt don bara ej fungerar som vi vill ha, allmänt peta materialet med en bit ståltråd bryter upp så att den flödar fritt ut munstycket, men i detta fall materialet inte bryts.
Vatten från en tvättflaska kan sprutas in i den övre halsen av pipetten att tvätta materialet ut igenom munstycket, men det skulle inte funka.
Den enda lösningen här är att göra en normal innanmäte av pipetten med destillerat vatten samt därnäst en invers avloppet igenom den övre halsen, så att partikeln åker ut i den andra änden.
Hurdan nyttjar du en Eppendorf-pipett?
En Epppendorf pipett är vad som heter en konstant volym pipett.
Den består av en cylinder med en en tryckknapp på en avslutning och ett skaft på den övriga.
Du fäster en engångsspets på skaftet.
Somliga modeller kan du ställa in volymen som skall avges, vissa är inte justerbara.
Vid bruk, trycker man ner knappen till det första stoppet, för in spetsen i vätskan som skall pipetteras, samt släpp upp knappen åkte att smidigt ta upp vätskan.
Sedan överför du pipetten till mottagande och tryck på knappen förbi det första stoppet till det andra stoppet, detta doserar vätskan
samt blåser ut den sista droppen för att försäkra noggrannhet, kasta spetsen före nästa användning.
Alltid du önskar pipettera upp vätska, får man exakt samma volym, med mycket hög exakthet.