En autentisk “high-tech” pipett är Eppendorf’s så kallade ”blåsa”.

Den kan placeras stadigt på mynningen utav pipett.

Vid sidan av Eppendorf är en utskjutande fattig fäst.

Dra dra ned för att alstra ett tomrum därinnanför blåsan.

Begagna tummen för att avfyra en tvåvägsventil när du är beredd att göra er lösning i pipett men se till att munstycket på din pipett ligger under ytan på lösningen så att du inte suga in luft i din pipett.
Detta kan orsaka att massor av lösning att gå förbi in i filtret i blåsans area som kommer att begära demontering, uttorkning samt substitution av delar.

När en fullgod antal utav lösningen har dragits in, så att menisken är ovan märket, begagna tummen för att skjuta tvåvägsventilen dra ned.

Tillverkar det försiktigt så att menisken sjunker långsamt till märket.

Efter kan man flytta lösningen i pipetten till förlaget och tryck tvåvägsventilen spaken nedåt för att tömma pipetten.

Munstycket av pipetten kan hållas i öppna luften för överföringen.

Till slut, pipetter samt byretter ackumuleras inert fixerad material, som måste avlägsnas från tid till annan.

Munstycket utav en byrett som har stoff som ej kommer att passera genom.

Du kan tarva använda en lina, att gallra ut detta stoff.

Det är bäst att göra det med petcock ventilen bort så att när man gör en omvänd byk efter du petat ut så att det är ledigt, kan materialet tvättas ut vid platsen för ventilen i stället för vid den övriga änden utav byretten cylindern.

För att illustrera att alltemellanåt don bara ej fungerar som vi vill ha, allmänt peta materialet med en bit ståltråd bryter upp så att den flödar fritt ut munstycket, men i detta fall materialet inte bryts.

Vatten från en tvättflaska kan sprutas in i den övre halsen av pipetten att tvätta materialet ut igenom munstycket, men det skulle inte funka.

Den enda lösningen här är att göra en normal innanmäte av pipetten med destillerat vatten samt därnäst en invers avloppet igenom den övre halsen, så att partikeln åker ut i den andra änden.

Hurdan nyttjar du en Eppendorf-pipett?

En Epppendorf pipett är vad som heter en konstant volym pipett.
Den består av en cylinder med en en tryckknapp på en avslutning och ett skaft på den övriga.
Du fäster en engångsspets på skaftet.
Somliga modeller kan du ställa in volymen som skall avges, vissa är inte justerbara.
Vid bruk, trycker man ner knappen till det första stoppet, för in spetsen i vätskan som skall pipetteras, samt släpp upp knappen åkte att smidigt ta upp vätskan.

Sedan överför du pipetten till mottagande och tryck på knappen förbi det första stoppet till det andra stoppet, detta doserar vätskan
samt blåser ut den sista droppen för att försäkra noggrannhet, kasta spetsen före nästa användning.

Alltid du önskar pipettera upp vätska, får man exakt samma volym, med mycket hög exakthet.

Som en nybörjare i ett forskningslabb, var det allra första projektet jag fick att pipettera inkrementella mikro-volymer H2O på en bit parafilm.

Trist!

Vägning av vätskan på parafilm samt jämföra vikt emellan 10 replikat för varje mikro-volym fortsatte en vecka före jag rörde något andra i dett labb!

Lyckligtvis hjälpte avsaknad på finansiering mig att sluta på detta labbet samt till flera andra spännande projekt under åren.

Däremot har vikten utav att ha en bra princip för pipettering som jag tränade.

Pipetten är att ett instrument i labbet som kan ge olika konklusion baserade på den person som använder den.

Detta är speciellt sant när man kör kvantifiering experiment.

Kolven släpps för snabbt, inte förvätning av en ny spets och ej doppa spetsen tillräckligt långt är mycket vanligt när man arbetar för snabbt i labbet.

Sådana misstag kan medföra differanser i volym mellan tester, vilket resulterar i skeva analysresultat.

Här är 10 tips som kan komma till hands när man utbildar personer i labbet.

Använd korrekt pipettspets

– Det är enkelt att säga!

Använd korrekt topp med rätt pipett.
Alternativa varumärken är godtagbara om de har testats av säljf företaget för att arbeta med ditt pipett varumärke.

Förväta pipettspetsen
– Förevätning ökar fuktigheten därinnanför spetsen, vilket minskar förångning.

Undersök spetsen innan dispensering av provet
– När man sänker spetsen för lågt i vätskan, finns det ofta tillägg droppar som fastnar på utsidan utav spetsen (till exempel vid pipettering av enzymer).

Se till att man torka utav utsidan mjukt före dispensering.

Se till att ej vidröra spetsöppningen för att undvika att suga bort en andel av önskad volym!

Begagnad standardläge pipettering
– Kom ihåg att begagna det övriga stoppet på pipetten för att dosera hela volymen.

Andrum konsekvent efter aspiration
– Efter att ha tappat opp vätska, gör det till en vana att stanna innan du drar ut spetsen helt.

Vätskan fortfar att flöda in i spetsen också efter att kolven stannat.

Avvika pipetten rakt ut
– Sidorna på behållaren som vätskan sugs orsakar uppsugning och förlust av volym

Begagnad konsekvent kolv tryck och hastighet – “Det handlar om rytm – repeterbara åtgärder ger repeterbara resultat”!

Sänk spetsen till rätt djupt
– Enorm volym pipetter (1-5 ml) ska vara nedsänkt 5-6 mm under menisken.
Mindre volymer pipetter ska nedsänkas 2-3 mm under menisken.
För mycket nedsänkning kommer att orsaka fluid att hålla sej till utsidan av spetsen, samt alltför liten nedsänkning kommer att leda till luftbubblor.

Minimera hanteringen av pipetten samt krönet
– Värmen överförs från händerna till pipetten samt / eller längst upp, detta kan affektera leveransvolymer.

Jobba på temperaturjämvikt
– Jobba på en konstant värme minimerar variationer i pipetterade volymer.

Detta är lite knepigt alldenstund många reagenser kräver lagring på fruset vatten, när processen för pipettering sker vid rumsvärme!
Om förfarandet ej medger temperaturjämvikt, då finns det mer viktiga tips som man borde bilda dej.