Pipetter
Olika sätt att avblåsa pipetteringsfel som förstör dina experiment
Om du arbetar på bänken, är adekvat pipettering bestämmande – utan detta är dina experiment icke-reproducerbara, stamlösningar felaktiga och analyser skulle inneha så stora fel så att mäta dem skulle vara lönlöst.
Men lyckligtvis finns det noll anledning till bävan – din pålitliga, exakthet mikro-pipetter ta hand om allt för dig.
Alternativt gör de?
Precisionsinstrument kan de vara, men noggrannheten hos mikro-pipetter beror på dig.
Du måste bibehålla dina pipetter väl träna, bäst princip samt ha förståelse för hurdan de fungerar innan man kan göra anspråk på att äga något liknande precisionsinstrument till ditt förfogande.
Gör så här:
Hurdan din pipett fungerar
Troligtvis nyttjar du en pipett med luftcirkulation.
Det fungerar lite som en spruta, bortsett från att det är en luftfylld kudde emellan kolven och provet.
Luftkudden förhindrar kolven från att anlända i kontakt med de lösningar, som är bäst, men det oxå sätter somliga begränsningar på pipetten.
Volymen av luftkudden påverkas av värme och tryck, och flyktiga lösningsmedel kan avdunsta in i den.
Var samt en av dessa påverkar pipettering grundlighet.
Den tunna luften deplacement pipetter är oxå känslig för kontaminering utav den pipetterade lösningen.
Om man jobbar med frätande eller biologiskt farliga material, kan detta vara ett bekymmer.
Det mesta utav informationen i denna artikel avser luftcirkulation pipetter, men i vissa belägenheter kan en positiv förskjutningspipett vara ett bättre alternativ.
Pipetter med positiv förskjutning funkar oxå som en spruta, men till skillnad från pipetter luftcirkulation, har de ingen luftkudde.
Detta gör dem mer exakt för pipettering utav flyktiga lösningsmedel, och mer lämpade för pipettering utav frätande samt bio-farligt material.
De är dyra, alldenstund pipan ersätts som en andel av spetsen, men kan vara ett bäst alternativ i somliga fall.
Ett billigare val är att använda luft förskjutnings pipett med barriär tips, men dessa bara lösa några av problemen.
Denna skänker fler info hur luft rubbning samt positiva pipetter deplacement jobbar.
Förvalta din pipett
Din pipett ska service var 6-12 månad alternativt oftare, avhängig på hurdan exakt du ska vara.
Tjänsten borde innefatta omkalibrering, smörjning utav rörliga delar samt substitution av delar.
Det är bäst att få detta gjort utav en bevandrad pipett doktor – om man arbetar i universitet alternativt stora affärsverksamhet kan det existera pipetteras kliniker du kan begagna, annars kan man skicka dina pipetter iväg till företag som kommer att göra det åt dig.
Kontrollera dina pipetter dagligen för skador på pipan (där spetsen är monterad) alternativt ett litet antal synliga skador.
Om det är ett problem, lämna den på service eftersom det är osannolikt att den matchar för jobbet du behöver det för.
Rengör dina pipetter var dag före användning – torka med omkring 70% sprit.
Deponera din pipett vertikalt med assistans utav en pipett hållare.
Detta förhindrar att vätskor som smugit sej in i cylindern utav pipetten från att ta vägen ytterligare inuti och korroderande.
Aldrig sätt din pipett på sin blad med vätska i spetsen.
Vätskan kan anlända in i pipetten och orsaka allvarliga korrosionsskador.
Begagnad välsittande tips.
Dåligt adekvat tips tillåter luft att anlända in vid intag och utströmning, som leder till felaktiga konklusion.
Hurdan man använder en mikropipett
En mikropipett nyttjas för att överföra små mängder (<1 ml) av vätskor.
Skalan på mikropipetter är i mikroliter (1000 µl = 1 ml och 1/1000 liter = 1 ml ).
Vi tittat på mikropipetter utav varumärket i detta lilla kommentar från Rainin som heter "Pipetman".
De finns i tre storlekar som kan pipettera tre serier utav volymer: P20 = 0, 5-20 µl, P200 = 20-200 µl och P1000 = 200-1000 µl.
De nyttjas i sammansättning med engångs (ofta steril) plast förslag, de mindre ett par mikropipetter (P20 samt P200) måste ha de gula spetsarna samt P1000 pipett nyttjar större blå tips.
Anvisningar för användning av mikropipett:
1. Överskrid aldrig den övre eller nedre gränsen för dessa pipetter. De är mycket dyra och ömtåliga redskap som man ej har råd att skada. Gränserna är:
P20: 0, 5 till 20, 0 µl
P200: 20 till 200 µl
P1000: 200 till 1000 µl
2. Ställ in önskad volym genom att rotera de centralt belägna ringarna medurs för att öka volymen eller moturs för att minska volymen.
3. Insätta ett tip på änden utav pipetten. OBS: Om sterila förhållanden behövs låt inte pipettspetsen att röra något annat föremål (inklusive händerna).
4. Kolven kommer att stanna vid ett par annorlunda lägen när den är nedtryckt.
Den första utav dessa hållplatser är punkten för inledande resistans och är den grad utav press som kommer att resultera i den önskade volymen av lösning som överförs.
Alldenstund denna första stoppunkt är avhängig volymen som överförs, kommer avståndet man innehar att driva kolven att nå den prick vari initialt mothugg ändras beroende på volymen som pipetteras.
Den övriga stoppunkten kan hittas när kolven trycks bakom det initiala motståndet tills den är i kontakt med kroppen av pipetten.
Vid denna prick ska kolven ej kan vidare nedtryckas.
Denna övriga stoppunkt används för kompletta utmatning utav lösningar från plastspetsen.
Du borde inte nå denna övriga halt vid utströmning utav vätska i pipetten, bara när sista droppen skall ut.
Innan man fortsätter, öva på att trycka kolven till var samt en av dessa hållpunkter tills du kan lätt skilja emellan dessa punkter.
5. Tryck dra ned kolven tills du känner det första motståndet och sätt spetsen i lösningen, bara föga under ytan utav vätskan samt inte så djup som genomförbart.
6. Mjukt och makligt släpper man efter att kolven.
OBS: Om lösningen man pipetterar är trögflytande, bevilja pipettspetsen att fylla på avgörande volym före du raderar den från lösning för att undvika förekomsten utav bubblor i spetsen som kommer att leda till en felaktig volym. Om man släpper kolven för snabbt kommer det att sugas opp fluid i pipetten samt skada den.
7. Töm ur lösningen till lämplig burk genom att trycka på kolven.
Den här gången, tryck in kolven till initialt motstånd, avvakta en sekund, och fortsätt efter att att pressa kolven så långt det går för att tömma hela volymen av lösningen.
8. Ta bort tippen igenom att prägla ned spetsen ”discarder”.
9. Kom ihåg att byta spets mellan annorlunda tester för att ej förorena nästa examination.