Vid denna volymetriska analysövningen kommer vi att begagna en 25 ml volymetrisk pipett.

En lärare innehar producerat denna övning samt är alltid gärna att låna ut en hand, han kommer att vara vår demonstrator för en korrekt användning av en volymetrisk pipett.

Välj ut en 25 ml pipett och drilla ett par gånger med destillerat vatten innan du nyttjar den för att dra i samtliga reagenser.

Det är alltid en bra förslag att undersöka var pipett man tar ur lådan eftersom man alltemellanåt kan finna en ”fripassagerare” som kom i samt kunde ej komma ut.

Det är ofta enkelt att hitta en som fastnade för länge efter, kanske redan på fjortonhundratalet.

Vi skulle vet ej hur gammal den är utan att främst göra några C-14 datering på den.

Man bör också undersöka tippen för fraktur.

Flera småskador är triviala.

Det är de visar mindre chipping runt kanten på spetsen, men här är en där hela väggen har brutits vid en punkt. Man kan blott knappt se den intakta munstycket, men en sådan pipett är oanvändbar alldenstund vätskevägen innehar äventyrats.

Bäst att dumpa den.

Man kommer att använda en av ett par typer utav suganordningar att fylla pipetten.

Om suganordningen är en gummiblåsa, bör den inte vara ligga så att den är ansluten till mynningen av pipett.

Det skall i stället att pressas så att hålet för blåsan gör en lufttät tätning mot mynningen på pipetten.

Observera att man ska klämma ihop blåsan före man tryckter den mot munnen av pipetten.

Spetsen på pipett kan sedan placeras i lösningen som ska upprättas och blåsan frigöras maklig.

Denna metod kräver en del träning, men i slutändan kan vara betydligt mer praktiskt och tillfredsställande än att använda den högteknologiska pipettsystemet som vi skall titta på i nästa exercis, med Eppendorf pipett.

Man måste bedriva noga med att ej bevilja spetsen på pipetten för att bryta ytan utav vätskan medan man drar ut utav lösningen eller en plötslig minskning i viskositet vid spetsen.

Detta kommer att orsaka en enorm antal fluid förorenar insidan utav din gummikolv på grund av inträde utav luft kommer att avfyra vätskan uppåt bortom mynningen på pipetten.

Dra opp lösningen tills menisken är flera centimeter ovan kalibreringskurvan, fason efter att snabbt fingret över det starta hålet i pipetten.

Se till att din siktlinje är vinkelrät mot längden på pipetten och tillåta en liten antal luft i så att menisken sjunker till märket.

När botten av menisken sammanfaller med märket, består av din pipett en exakt uppmätt volym.

Pipetten kan efter att tas bort från reagenslösning, överföras till den mottagande kolven och tillåtas dräneras.

En volymetrisk pipett skall ej “blåses ut” för att mata ut all fluid vid spetsen alldenstund volymetriska pipetter kalibreras på ett sätt som tar aktsamhet till den lösning som förblir i spetsen på grund av ytspänningen.

Den genomsnittliga takt som fel inträffar kan uttryckas som MTBF.

I motsats till den felfrekvens som mäter antalet fel per tidsenhet, mäter MTBF det kumulativa antalet fel i en ansamling pipetter under en tidsperiod för att avgöra den genomsnittliga tid som förflutit mellan fel.
På grund av detta är MTBF och felfrekvens inverser till varandra: en hög MTBF baseras på en låg felfrekvens.
En hög MTBF är önskvärd eftersom det innebära att risken för en bestämd pipett innehar misslyckats är liten.

Med assistans utav MTBF, kan man förutsäga hurdan länge en pipett kan förväntas bibehålla grundlighet och precision.
MTBF för enskilda pipetter kan fluktuera ordentligt avhängig på en rad faktorer.
Till exempel kommer en pipett som används dagligen misslyckas snabbare än en pipett som nyttjas mindre ofta.

Dessutom kommer provar av kemiskt aggressiva eller korrosiva prover oxå att avta MTBF.

Ett sätt att avgöra MTBF, är att efterspana en grupp pipetter tills var en innehar misslyckas, bestämma hurdan lång tid det tar för varje pipett misslyckas.
Medelvärdet av alla fel tiden är MTBF för den specifika gruppen utav pipetter.

MTBF kan även bestämmas matematiskt, med användning utav formeln nedan:

t är tiden efter den senaste kalibreringen,
% Misslyckades är den kumulativa andelen pipetter befunnits ha misslyckats sedan den senaste föregående kalibreringen.

I dessa exmpeldata misslyckades totalt 27, 3 andel utav pipetterna på eller före sex månaders intervall.
Med användning av ovanstående ekvation för t = 6 och % misslyckades = 27, 3, är MTBF beräknat vara 18, 8 månader.

Mål Pålitlighet Grad:

Aktuella bästa bruk för pipett förvaltningen är att skapa målnivåer pålitlighet vid 95 andel eller högre.
Detta innebära att om omkalibrering eller verifiering kommer minst 95 andel utav pipetterna hittas för att vara verksamma inom fastställda toleranser, med bara 5 procent som genererar felaktiga resultat.

Vid bestämning utav en önskad målnivå pålitlighet, element som tolkning precision misslyckades effekterna utav pipetter för testresultat, rättslig försvarliga resultat samt produktion beslut om utsläpp är viktiga.
Enhetlighet med aktuell riktlinjer kan oxå tillämpas.

När det uppsatta målet för tillförlitlighetsnivå för ett laboratorium samt MTBF för denna typ utav pipett bestäms, kan därnäst formel användas för att identifiera den optimala kalibreringsfrekvensen:

Cal_Interval är kalibreringsfrekvens i år behövs för att uppnå den nivå målet
tillförlitlighet MTBF är tiden före misslyckande i år
In är den naturliga logaritmen
TRL är det önskade målet tillförlitlighetsnivå i procent
Som ett exempel, när ett laboratories önskat mål för tillförlitlighetsnivå är 95 andel samt MTBF är ett par år, är den beräknade kalibreringsintervall 0, 103 år, eller var 5, 3 vecka.

Optimal kalibreringsfrekvens

När etablerade TRL för ett laboratorium samt MTBF för pipetten prestanda bestäms, kan denna nummer nyttjas för att identifiera den optimala kalibreringsfrekvens.

Gemensamma MTBF siffror samt målnivåer pålitlighet kan plottas som laboratorier kan använda för att avgöra optimala justering frekvenser.
Antag att de sökta tillförlitlighetsnivå är en bransch bästa praxis 95 andel samt MTBF är två år.

Att fastställa lämplig kalibreringsfrekvens, följer linjen indikerar MTBF på ett par år i diagrammet tills den möter 95 andel nivån på Y-axeln.
Analog prick på X-axeln visar den önskade kalibreringsintervall, som i detta fall, är emellan fem samt sex veckor.
Därför kontrollerar dessa pipetter minst var 5-6 veckor så att de skall uppnå den etablerade pipettens avsikt om prestanda kvalitet.

Quality Control Principer:

Som samtliga precisionsinstrument för laboratorier skall mekanisk influens på pipetter bli föremål för principer för kvalitetskontroll.
Absolut som behövs för spektrofotometrar och saldon skall pipetter kalibreras regelbundet för att verifiera prestanda.

Desto oftare pipetter kontrolleras (kalibrering eller verifiering) utförs, kommer de för dåligt fungerande pipetterna upptäckas samt tas ur drift.
Omvänt, ju längre en defekt pipett kvarstår i tjänst, desto flesta förpliktelse innebär detta.